想象這樣一個(gè)場(chǎng)景,一架無(wú)人機(jī)緩緩飛過(guò)一片廣袤的農(nóng)田,短短幾十秒內(nèi),它的鏡頭拍下了這樣的畫面——有些土地在特定波段的光下泛出淡淡的綠色,而另一些則透出詭異的紅光。農(nóng)民看著這張照片,馬上知道哪里缺乏養(yǎng)分了。
通過(guò)無(wú)人機(jī)拍照來(lái)看守農(nóng)田(圖片來(lái)源:作者使用AI生成)
這是一項(xiàng)來(lái)自麻省理工學(xué)院(MIT)的前沿研究,核心技術(shù)是高光譜報(bào)告分子。它讓細(xì)菌第一次具備了遠(yuǎn)距離反饋信息的能力,從土壤營(yíng)養(yǎng)、重金屬污染到微生物生態(tài)狀態(tài),通通可以通過(guò)“發(fā)光的細(xì)菌”進(jìn)行實(shí)時(shí)監(jiān)控。
(圖片來(lái)源:參考文獻(xiàn)[1])
但這到底是怎么實(shí)現(xiàn)的?細(xì)菌為何能發(fā)光?這些高光譜信號(hào)又是如何被無(wú)人機(jī)讀取的?
細(xì)菌為什么能發(fā)光?
嚴(yán)格來(lái)說(shuō),這些細(xì)菌并不是真的在發(fā)光——它們不是螢火蟲那種能在黑夜中發(fā)出肉眼可見(jiàn)光的生物。而是它們生產(chǎn)出一種具有獨(dú)特光譜吸收特征的色素分子,能夠在自然光照下改變反射光,從而在高光譜成像設(shè)備中顯現(xiàn)出來(lái)。這類色素就被稱為高光譜報(bào)告分子(HSRs)。
我們熟知的綠色熒光蛋白(GFP)等傳統(tǒng)發(fā)光工具,在實(shí)驗(yàn)室里的確非常好用,但這種方法的有效距離短,大多依賴于激光激發(fā),探測(cè)范圍往往不超過(guò)幾米。所謂激發(fā)光,就是指用特定波長(zhǎng)的光照射熒光分子,使其躍遷至高能態(tài),從而在返回基態(tài)時(shí)釋放出可見(jiàn)光的過(guò)程。如果想要遠(yuǎn)距離如幾十米、上百米查看一大片土地或森林中細(xì)菌的活動(dòng)情況,GFP就無(wú)能為力了。
高光譜成像是一種能夠看見(jiàn)上百個(gè)波長(zhǎng)上的反射光強(qiáng)度的技術(shù),它不只是一張彩色照片,而是每一個(gè)像素都有自己的光譜指紋。研究人員想出的妙招是,設(shè)計(jì)一種細(xì)菌,它能在特定條件下合成具有獨(dú)特光譜吸收特征的色素分子。一旦這些色素在細(xì)菌體內(nèi)產(chǎn)生,它們會(huì)吸收自然光中特定波段的光,從而使被細(xì)菌覆蓋的那一塊土壤或沙地,在高光譜成像圖中呈現(xiàn)出不同尋常的顏色指紋。
最優(yōu)發(fā)光分子,膽綠素與細(xì)菌葉綠素
這次研究中,科學(xué)家先從兩個(gè)角度來(lái)篩選“最優(yōu)HSR”,一是光譜的獨(dú)特性,越不容易跟背景中其他成分顏色相近,也就越容易識(shí)別;二是合成的簡(jiǎn)便程度,需要的代謝步驟越少,在細(xì)菌中越容易表達(dá)。
最終篩選出的兩種分子分別是,膽綠素 IXα(Biliverdin IXα),一種來(lái)源于血紅素代謝的綠色色素,也能作為紅外熒光蛋白的底物,具有鮮明的可見(jiàn)-近紅外吸收峰;另一種是細(xì)菌葉綠素a(Bacteriochlorophyll a),廣泛存在于光合細(xì)菌中,吸收波長(zhǎng)長(zhǎng)達(dá)864納米,極易被高光譜相機(jī)捕捉。
膽綠素 IXα與細(xì)菌葉綠素a分子結(jié)構(gòu)(圖片來(lái)源:參考文獻(xiàn)[1])
通過(guò)合成生物學(xué)手段,科學(xué)家將這些色素合成路徑嵌入到土壤細(xì)菌 Pseudomonas putida 和水生細(xì)菌 Rubrivivax gelatinosus 中,打造出可響應(yīng)信號(hào)并在高光譜圖像中“發(fā)聲”的活體探測(cè)器。
這些發(fā)光細(xì)菌能做什么,從實(shí)驗(yàn)室到田野的實(shí)際應(yīng)用
高光譜報(bào)告分子的價(jià)值,遠(yuǎn)不止于能發(fā)出獨(dú)特光譜這么簡(jiǎn)單。研究團(tuán)隊(duì)首先在實(shí)驗(yàn)室中對(duì)這些經(jīng)過(guò)基因設(shè)計(jì)的細(xì)菌進(jìn)行了系統(tǒng)測(cè)試。他們分別將產(chǎn)膽綠素的 Pseudomonas putida 和產(chǎn)細(xì)菌葉綠素的 Rubrivivax gelatinosus 培養(yǎng)在瓊脂、沙盤或土壤中,用高光譜相機(jī)從不同距離進(jìn)行成像。結(jié)果顯示,兩種細(xì)菌都能在自然光照條件下表現(xiàn)出清晰、可識(shí)別的光譜特征。
這一系統(tǒng)的另一個(gè)亮點(diǎn),是它的模塊化設(shè)計(jì)。高光譜色素的合成路徑與上游的感應(yīng)元件之間是“插拔式”連接,只要更換感應(yīng)模塊,就能讓同一細(xì)菌響應(yīng)不同的化學(xué)或環(huán)境信號(hào)。例如,研究人員將一種細(xì)菌信號(hào)分子“對(duì)香豆酰高絲氨酸內(nèi)酯”(pC-HSL)作為感應(yīng)對(duì)象,構(gòu)建了可響應(yīng)其存在的膽綠素合成通路。實(shí)驗(yàn)中,他們?cè)谏潮P中埋下一小片含pC-HSL的濾紙,然后噴灑改造后的細(xì)菌。不久后,這些細(xì)菌便在感應(yīng)到信號(hào)后合成膽綠素,生成光譜信號(hào)。無(wú)人機(jī)或固定相機(jī)捕捉到的圖像中,出現(xiàn)了一圈發(fā)光的擴(kuò)散區(qū)——科學(xué)家由此還原出信號(hào)在土壤中擴(kuò)散的過(guò)程,甚至能通過(guò)擬合公式計(jì)算出擴(kuò)散的速率和響應(yīng)時(shí)間,顯示系統(tǒng)在3小時(shí)內(nèi)即可探測(cè)反應(yīng),半峰值響應(yīng)時(shí)間約為7.8小時(shí)。
而在另一個(gè)更具挑戰(zhàn)性的實(shí)驗(yàn)中,研究人員讓細(xì)菌響應(yīng)一種長(zhǎng)鏈群體感應(yīng)信號(hào)分子(3OH-C14-HSL),并通過(guò)構(gòu)建基因反相門來(lái)控制細(xì)菌葉綠素的合成,從而建立起一個(gè)更為復(fù)雜的邏輯回路。這套系統(tǒng)被測(cè)試于更遠(yuǎn)距離,細(xì)菌先在實(shí)驗(yàn)室中誘導(dǎo)表達(dá),之后被鋪灑在非無(wú)菌沙土中,再由無(wú)人機(jī)從54米的高空拍攝圖像。結(jié)果顯示,即使在這類戶外復(fù)雜背景中,系統(tǒng)依然能精準(zhǔn)區(qū)分不同濃度下的光譜信號(hào),響應(yīng)范圍可達(dá)250倍。如果再進(jìn)一步將相機(jī)架設(shè)在9層樓高的建筑屋頂,從90米外捕捉圖像,也能在4000平方米的范圍內(nèi)分辨信號(hào)差異,識(shí)別準(zhǔn)確率高達(dá)99%。
沙地中3OH-C14-HSL的檢測(cè)結(jié)果(圖片來(lái)源:參考文獻(xiàn)[1])
這些成功案例充分說(shuō)明,高光譜報(bào)告分子不僅能夠在受控實(shí)驗(yàn)環(huán)境中工作,在復(fù)雜甚至臟亂的真實(shí)場(chǎng)景中同樣穩(wěn)定可靠。
總結(jié)
高光譜報(bào)告分子為我們打開了一扇觀察環(huán)境的新窗口。通過(guò)將可感知土壤情況的基因線路植入微生物體內(nèi),科學(xué)家打造出了一種無(wú)需電力、能響應(yīng)多種信號(hào)、可遠(yuǎn)程讀取的生物哨兵系統(tǒng)。它不只是合成生物與遙感技術(shù)的一次巧妙融合,更是我們監(jiān)測(cè)土地方式的一次躍遷。
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作者丨Denovo科普?qǐng)F(tuán)隊(duì)(褚宏偉博士 湖南師范大學(xué)碩士生導(dǎo)師)
審核丨趙寶鋒博士 遼寧生命科學(xué)學(xué)會(huì)
來(lái)源: 科普中國(guó)創(chuàng)作培育計(jì)劃
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